茶树转录因子基因CsDREB-A4 的克隆与温度胁迫响应的分析
关键词:茶树;转录因子;DREB 类;进化分析;温度胁迫;表达分析
摘 要:基于本实验室茶树品种迎霜的转录组数据,通过PCR 方法从迎霜的DNA 中克隆得到CsDREB-A4 基因。分析显示,该基因含开放阅读框长708 bp,编码235 个氨基酸,含有AP2/ERF 家族转录因子典型的保守AP2结合域,并且与大豆、番茄、葡萄、拟南芥等的DREB 转录因子有高度同源性。从进化树、亲/疏水性、无序化特性、二级和三级结构等方面进行预测与分析,结果表明,该转录因子属于AP2/ERF 家族中的DREB 亚族的A4 组,大多数氨基酸属亲水性氨基酸,无序化特征比较明显,三级结构与AtERF1 相似。利用实时荧光定量PCR 分析表明,在迎霜、安吉白茶、云南十里香3 个茶树种中CsDREB-A4 基因均受高温、低温诱导表达。在4℃处理下,在上述3 个茶树品种中CsDREB-A4 基因表达量均在24 h 时达到最大值,分别为对照的23、4、43 倍,并且CsDREB-A4 基因在迎霜和云南十里香中均比安吉白茶的基因表达上调时间更长,上调程度更大。在38℃处理下,CsDREB-A4 基因在迎霜和云南十里香中表达受抑制,均只在8 h 时表达量高于对照,而在安吉白茶中表达量显著增加,在12 h 时高达对照的2 720 倍。