关键词：膜脂质类;计算生物学;超速离心法;下丘脑;蛋白质类;基因组;脂筏;membrane lipids;computational biology;ultracentrifugation;hypothalamus;proteins;genome;lipid raft
摘 要：　　目的验证蔗糖密度梯度超速离心法提取脑组织脂筏的有效性。方法用蔗糖密度梯度超速离心法提取小鼠脑组织脂筏，采用免疫印迹法、双酶胆固醇检测法结合光散射度分析样品的脂筏属性，采用液质联用蛋白组学技术和生物信息学手段，对脂筏中的蛋白质细胞定位进行分析。结果超速离心法提取的脑组织脂筏具有典型的高散色度、高胆固醇和高表达Flotillin-1的脂筏特性；液质联用蛋白组学分析从脂筏样本中鉴定出647种蛋白质，这些蛋白质细胞定位大多是细胞膜、内质网、细胞骨架和细胞浆等常见的脂筏蛋白来源，这种脂筏样品是含有杂质的混合物，鉴定出的647种总蛋白中，有21%是细胞核、线粒体和核糖体等非脂筏来源蛋白。结论超速离心法是提取脑组织脂筏的有效方法，但应用中要考虑杂蛋白的影响。