树干毕赤酵母基因组文库的构建及纤维二糖酶基因的筛选
作者单位:马经纬,张梁,石贵阳,MA Jing-wei,ZHANG Liang,SHI Gui-yang(工业生物技术教育部重点实验室,江南大学,江苏无锡214122;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江南大学,江苏无锡214122)薛卫,XUE Wei(南京农业大学信息科学技术学院,江苏南京,210095)
加工时间:2014-03-15
信息来源:食品与生物技术学报
关键词:树干毕赤酵母;基因组文库;基因筛选;纤维二糖酶
摘 要:首次构建了树干毕赤酵母DNA基因组文库,该文库包含3 000个克隆,插入片段长度为0.5~8.0 kb.树干毕赤酵母染色体基因为15 441 179 bp,该文库覆盖1.08倍树干毕赤酵母染色体基因,筛选出任一基因或序列的概率为97%.提取文库中的质粒醋酸锂法转化酿酒酵母W303-1A,涂布于纤维二糖为唯一碳源的平板,通过纤维二糖酶对底物纤维二糖的底物特异性筛选文库,首次获得树干毕赤酵母来源的一个1.82 kb的纤维二糖酶基因.