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草鱼出血病病毒vp6核酸疫苗的免疫效果评估
作者:李婧慧;邹勇;倪金俤;杨鸢劼;陈辉;徐诗英;刘林;贡成良;曹广力;薛仁宇 作者单位:江苏省水生动物疫病预防控制中心,南京210036;江苏省水生动物疫病预防控制中心,南京210036;南京师范大学生命科学学院,南京210036;苏州大学基础医学与生物科学学院,苏州215123 加工时间:2014-05-15 信息来源:《中国水产科学》
关键词:草鱼出血病病毒;vp6基因;核酸疫苗;免疫;相对存活率
摘 要:为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6.按每尾分别注射疫苗载体10、30、60 μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14 - 20 cm,体质量60 - 120 g),同设pFastBacTMDual载体(30 μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无菌水).于免疫后不同时间通过RT-PCR检测免疫鱼体中vp6基因的表达,并于免疫后第14、21、28、49、70天分别通过间接凝集反应检测血液中的抗体水平,并在免疫第21天感染GCRV评估免疫保护效果.结果显示,核酸疫苗免疫草鱼后,各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第28天达到最高;攻毒后每尾注射疫苗载体10、30、60 μg组的死亡率分别为0%、0%、5%,pFastBacTMDual载体对照组和空白对照组分别为30%和100%.表明构建的核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果.
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