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重组人乙酰胆碱酯酶的表达及其抑制剂的筛选(英文)
作者:王向军;吴怀秀;叶珊珊;潘兰英;钱永常; 加工时间:2014-02-25 信息来源:药学学报
关键词:重组;乙酰胆碱酯酶;HEK293细胞;酶活性;抑制剂;筛选;多奈哌齐
摘 要:本研究旨在表达重组人乙酰胆碱酯酶(recombinant human acetylcholinesterase,rhAChE)并应用于乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选研究。利用质粒pCMV-AChE瞬时转染HEK293细胞,分泌表达rhAChE。考察rhAChE的酶活性:以碘化硫代乙酰胆碱(ATCh)为底物进行酶底物动力学研究获得rhAChE的米氏常数Km,以多奈哌齐(donepezil)为抑制剂进行酶抑制作用动力学研究获得Ki、Ki’等参数。利用rhAChE测定新化合物的IC50值,评价新化合物的抑制活性,同时将研究结果与文献报道的提取大鼠AChE的抑制活性进行比较。结果测得rhAChE的Km为151...
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