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烟草普通花叶病毒抗血清的吸附纯化及应用
作者:李乃会;罗朝鹏;魏春阳;杨军;金大伟;金立锋;李峰;林福呈 作者单位:山东临沂烟草有限公司,山东省临沂市新华路119号276003;中国烟草总公司郑州烟草研究院,郑州高新技术产业开发区枫杨街2号450001 加工时间:2013-11-15 信息来源:《烟草科技》
关键词:烟草普通花叶病毒(TMV);抗血清;吸附纯化;ELISA
摘 要:为了检测烟草普通花叶病毒(TMV),使用提纯病毒免疫小白鼠,制备TMV抗血清,对抗血清进行了吸附纯化,并建立了基于自制TMV抗血清的ELISA检测体系.蛋白电泳研究结果表明,提取的TMV纯度和浓度都很高;经过烟草总蛋白吸附纯化后,有效去除了非特异性反应;通过效价测定,确定TMV抗血清的效价高达1:40960;正交连续稀释法确定的ELISA检测最佳试剂浓度为:酶标二抗稀释度1:20000,TMV抗血清稀释度1:2000,病叶样品的稀释度为1:20.
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