关键词：重组氨肽酶;底物特异性;协同水解;玉米蛋白质;recombinant aminopeptidase;substrate specificity;collaborative hydrolysis;corn protein
摘 要：以9种不同的氨基酸-对硝基苯胺为底物,考察重组枯草芽孢杆菌氨肽酶对底物的特异性.结果显示,该氨肽酶对由疏水氨基酸组成的Leu-pNA水解活力最强,其次是两种由碱性氨基酸组成的Arg-pNA、Lys-pNA,对其它几种由疏水氨基酸组成的Ala-pNA、Ile-pNA、Val-pNA、Phe-pNA、Pro-pNA表现出较弱的水解活力,而对酸性氨基酸组成的Glu-pNA则无水解活力.在此基础上考察其与内切蛋白酶协同水解玉米蛋白质的效果,以水解度为指标进行单因素试验,明确氨肽酶与碱性蛋白酶复配水解玉米蛋白质的效果较佳.双酶水解产物中新增游离氨基酸含量分别为碱性蛋白酶和氨肽酶单独水解的4.89倍、6.05倍;水解产物中多肽相对分子质量多在1 000Da以下,其中500～1 000 Da的寡肽占14.57％,180～500 Da的小肽质量分数为68.42％,水解度达65％.这些结果表明,氨肽酶和碱性蛋白酶协同水解蛋白质原料具有良好的应用前景.