关键词：β-甘露聚糖酶；木聚糖酶；共表达；条件优化
摘 要：为实现β-甘露聚糖酶基因和木聚糖酶基因在毕赤酵母中的共表达,作者将经SalⅠ线性化的pPIC9K-xynⅡ电转化至工程菌GS115/Anman5A中,经G418浓度梯度筛选后获得能同时高产β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的双重重组子GS115/Anman5A-xynⅡ.SDS-PAGE显示目的蛋白的相对分子质量分别约为52 000,24 100.摇瓶发酵筛选出产酶活性最强的转化株,命名为GSM X2,随后对该菌株的表达条件进行初步优化,优化后的表达条件为:诱导时间120 h,培养基起始pH值为7.0,甘油添加量为1.5％,甲醇添加量为1.5％.在此培养条件下,产β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的活性分别达到37.1 U/mL和193.6 U/mL.