关键词：茶树；丙酮酸脱氢酶；启动子；亚细胞定位；抗寒
摘 要：根据以往试验获得的CsE1α 的cDNA 全长序列，利用TAIL-PCR 克隆CsE1α 启动子。测序验证与生物信息学分析后发现，该启动子片段长336 bp，含有2 个CAAT-box，2 个TATA-box，2 个GATA-box，1个LTR，1 个G-box 等顺式作用元件。构建载体转入洋葱内表皮细胞瞬时表达，启动子可启动下游报告基因，使荧光蛋白表达于整个细胞，表明所克隆的启动子具有启动功能。CsE1α 与GFP 融合蛋白瞬时表达表明CsE1α 定位于线粒体。本实验为下一步转基因拟南芥稳定表达，进一步研究CsE1α 基因的表达调控，探讨茶树花粉抗寒的分子生物学机理奠定基础。