关键词：耐热木聚糖酶;毕赤酵母;异源表达;酶学性质
摘 要：将一种11家族极端耐热木聚糖酶的密码子优化基因Syxyn11克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,得到重组质粒pPIC9K-Syxyn11,将其经Sal Ⅰ线性化后转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115.经G418筛选得到重组工程菌GS115/Syxyn11,用甲醇诱导表达重组木聚糖酶SyXyn11,酶活可达到17.74 U/mL.SDS-PAGE显示,SyXyn11的相对分子质量为31 000.SyXyn11的最适反应温度为85℃,在80℃以下稳定.最适反应pH为6.5,在pH 5.0～7.5范围内稳定.EDTA和大多数金属离子对重组酶的活性影响不大.结果表明Syxyn11成功在P.pastoris GS115中实现表达,而且重组木聚糖酶的耐热性并未改变.