关键词:猪源Mx1基因;原核表达;抗血清
摘 要:利用1对特异性引物,从pT-poMx1中扩增出Mx1基因开放式阅读框(1 992 bp),并将其编码区插入到携带GST标签的原核表达载体pGEX-6p-1中,经酶切和序列测定后,重组质粒pGEX-poMx1转化陶大肠杆菌BL21( DE3),利用IPTG诱导表达融合蛋白并分析表达效果.结果表明:经终浓度为0.8 mmol· L-1 IPTG诱导后4h,猪源Mx1基因(poMx1)在BL21(DE3)中获得高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%,SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量为99×103.将目的蛋白切胶后免疫Balb/c小鼠,制备了特异性多抗血清,Western blot结果显示该抗血清与融合蛋白孵育反应后有明显的特异性条带.结论:poMx1基因表达成功.