烟草抗PVY~N突变株eIF4E基因的克隆及表达差异分析
关键词:烟草;抗PVYN突变株;eIF4E基因;克隆;表达
摘 要:为了明确抗马铃薯Y病毒病的相关基因、进一步揭示其抗病机制,以烟草高抗马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Y vein necrosis strain,PVYN)突变株SN01和SN02为试验材料,研究了突变株的抗病相关基因翻译起始因子4E(eIF4E)在寄主中的抗病作用。结果表明:从抗病突变株SN01和SN02中克隆到目的全长基因,分别命名为eIF4E01与eIF4E02,其开放阅读框ORF长度均为669 bp,编码222个氨基酸;利用MAGA4.1和CLUSTAL软件进行序列同源性比对分析表明,eIF4E01和eIF4E02与已报道的烟草eIF4E(GenBank:AY702653.1)基因序列相似度均达到99%,其开放阅读框序列完全一致。并与甜椒、番茄、拟南芥等物种的eIF4E家族基因也具有高度同源性;Real-time PCR结果表明,在PVYN侵染初期(接种后0~9 d),突变株SN01和SN02中的eIF4E基因表达量明显低于其感病亲本NC89和K326。说明这两个抗病突变株中的eIF4E基因的抑制表达与烟草对PVYN的抗性密切相关。