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矿山型东南景天cDNA表达文库构建与耐镉基因筛选
作者:刘明英;乔桂荣;蒋晶;邱文敏;卓仁英 作者单位:中国林业科学研究院亚热带林业研究所,浙江富阳311400;林木遗传育种国家重点实验室,北京100091 加工时间:2014-05-15 信息来源:《林业科学研究》
关键词:东南景天;cDNA文库;耐镉;酿酒酵母
摘 要:以筛选出的镉超积累矿山型东南景天为材料,经镉胁迫后提取总RNA,纯化mRNA,利用改良SMART技术合成了全长cDNA,回收500 bp以上cDNA大片段克隆到改造过的大肠杆菌/酵母穿梭载体pYES2.0G中,建成东南景天镉全长cDNA文库,对随机挑取的阳性克隆进行PCR鉴定,插入片断大小在1 000bp左右,说明所构建的文库达到了用于目的基因分离筛选和表达的建库要求,为将来筛选克隆与东南景天抗重金属相关基因奠定了基础.
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