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流式细胞术检测体外微核方法的验证
作者:欧红梅;周长慧;涂宏刚;徐灵芝;常艳; 加工时间:2016-01-20 信息来源:中国新药杂志
关键词:CHO-K1细胞;体外微核试验;流式细胞仪;人工阅片;方法验证
摘 要:目的:采用不同作用强度、不同作用机制的遗传毒性化合物及非遗传毒性化合物验证已建立的96孔板流式细胞术体外微核自动化检测方法。方法:试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),加样后24 h(5-氟尿嘧啶为48 h)收获细胞。验证的化合物分别选择3个不同浓度处理CHO-K1细胞,设置环磷酰胺(+S9组)或丝裂霉素C(-S9组)的阳性对照和溶剂对照。采用EMA和SYTOX green双色标记,流式细胞仪分析96孔板的微核率,并与常规平皿培养、人工阅片的细胞分裂阻滞法的双核微核结果进行比较。结果:人工阅片和流式细胞术检测验证化合物诱导CHO-K1细胞微核的结果一致。在有或无S9...
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