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呋喃唑酮人工抗原的制备与鉴定
作者单位:江南大学食品学院,江苏无锡,214122 加工时间:2014-03-15 信息来源:食品与生物技术学报
关键词:呋喃唑酮;酶联免疫检测;抗原;抗体;furazolidone;ELISA;antigen;antibody
摘 要:为了制备3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)的完全抗原,作者以乙醇肼和碳酸二甲酯为原料,首先合成了3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ),然后通过对醛基苯甲酸对AOZ进行衍生制得3-(4-羧基苯亚甲基)-氨基-2-恶唑烷酮(CPAOZ),以CPAOZ作为半抗原,经水溶性碳化二亚胺法(EDC),缩合酯化法(DCC)和混合酸酐法(MA)法3种方法分别与载体蛋白偶联,合成人工抗原.对于制备产物通过紫外光谱扫描分析进行了鉴定,3种抗原的偶联比率分别为8、12、17.采用3种抗原做为包被原,建立了酶联免疫(ELISA)抑制曲线.结果表明,对AOZ的半数抑制率(IC50)分别为12.9、7.6、1.1 ng/mL.采用混合酸酐法(MA法)制备的包被抗原与抗体具有较好的匹配性.3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ),是硝基呋喃类抗生素呋喃唑酮在动物体内的稳定代谢物,采用本试验制备的抗原,有望获得特异性更好的抗体.
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