关键词：表面等离子体共振;肠炎沙门氏菌;核酸适配体;食品
摘 要：在食品安全逐渐被公众所关注的今天,如何让食物更安全、健康成了当今社会的主要课题。在食品安全问题中,肠炎沙门氏菌主要引起畜禽的胃肠炎以及人类肠炎和食物中毒,是重要的人畜共患病原体。近年来对食品沙门氏菌的研究多集中于鼠伤寒沙门氏菌,而忽略了同样具有致死作用的肠炎沙门氏菌。同时,为了克服传统检测方法步骤繁琐、耗时长等缺点,需建立一种快速准确的检测方法。本实验建立了肠炎沙门氏菌的快速检测方法,主要采用表面等离子体共振生物传感器(SPR)为检测仪器,为检测过程提供快速、准确、无损、不需标记、简单操作的有效实验依据。并且,本实验选用的识别元件为特异性非常好的核酸适配体来代替抗体进行免疫识别,核酸适配体较抗体具有更好的稳定性和特异性,而且其分子量更小,用量更少,更便宜。实验结果表明,肠炎沙门氏菌的生长曲线显示培养4h的菌株浓度为2.1×108cfu/mL。SPR过程中最佳实验流速应选择5μL/min,核酸适配体的最佳固定浓度为180nM,最佳再生溶液为20mM浓度的NaOH溶液,并且与食品中常见的致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌)几乎没有交叉反应。实验建立了肠炎沙门氏菌浓度与SPR信号之间的定量检测标准曲线,其最低检出限为2 cfu/mL。对超市购买来的鸡柳、猪肉、虾、鱼食品样品,进行检测,并对其结果进行平板计数验证,证明了本实验方法和结果的可靠性和应用价值,同时具有时间短,检出限低,易操作等优点,可用于大量的食品样品检测。
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