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阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白质双向电泳技术和图谱的建立
作者:吴清平;莫树平;张菊梅;董晓晖 作者单位:广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,广东广州 510070;广东省微生物研究所,广东广州 510070;中国科学院南海海洋研究所,广东广州 510301;广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,广东广州 510070;广东省微生物研究所,广东广州 510070;中国科学院大学,北京100049 加工时间:2014-07-15 信息来源:《食品与机械》
关键词:阪崎克罗诺杆菌;蛋白质组学;双向电泳;蛋白质图谱
摘 要:建立阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白双向电泳技术.采用2种不同的尿素3-[3(胆酰氨丙基)二甲氨基]1-丙磺酸(CHAPS)二硫苏糖醇(DTT)裂解法兼反复冻融提取阪崎克罗诺杆菌ATCC 29544全菌蛋白,在2种pH范围的固相pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳,胶体考染后获得的双向电泳图谱进行Image Master 2D Platinum软件分析.结果表明,获得全菌的蛋白浓度为5.32 μg/μL;裂解液成分:尿素7 mol/L,硫脲2 mol/L,CHAPS 4% (m/V),DTT 1%(m/V),PMSF 45 mg/L,pH 3~10 IPG缓冲液2% (V/V).该技术成功构建了阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白质双向电泳图谱.
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