【目的】克隆Q型烟粉虱(Bemisia tabaci)化学感受蛋白1(chemosensory protein 1,CSP1)基因,诱导表达Q型烟粉虱CSP1重组蛋白(以下简称Bt CSP1),研究其与主要寄主植物挥发性气味分子的结合特性。【方法】利用全长引物通过RT-PCR扩增并克隆Q型烟粉虱CSP1基因ORF全长,连接并构建p ET-30a(+)原核表达载体,转化入BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,并用IPTG诱导表达Bt CSP1重组蛋白。收集菌液后超声破碎细胞,离心取上清,经Ni2+-琼脂糖柱结合梯度浓度咪唑洗脱纯化后,经PBS反复透析获得重组蛋白,并用Bradford法测定重组蛋白浓度。采用常见的N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)荧光探针作为报告子,利用荧光竞争结合法研究重组Bt CSP1蛋白与植物挥发物的结合功能。首先用1 mmol·L-1 1-NPN滴定Bt CSP1蛋白溶液,直至蛋白最大发射波长处的荧光值完全猝灭为止,然后再以各供试配基滴定Bt CSP1-1-NPN体系,通过配基竞争猝灭1-NPN最大发射波长,并用Scatchard等方程计算表征Bt CSP1与配基亲和力大小的解离常数KD。【结果】克隆了Q型烟粉虱CSP1基因ORF全长,经双酶切和连接构建了p ET-30a(+)/CSP1重组质粒,在IPTG终浓度为1 mmol·L-1的条件下诱导获得了Bt CSP1重组蛋白,Ni2+-琼脂糖柱纯化透析后测定重组蛋白浓度,稀释至1.5μmol·L-1作为工作浓度。在荧光光谱试验中,Scatchard方程线性化后(相关系数达到0.9967),显示Bt CSP1与1-NPN的解离常数K1-NPN为2.78μmol·L-1,结合位点数n为0.82,表明两者结合较好,且基本是1:1结合,适合作为本试验中竞争性荧光结合试验的报告子。在荧光竞争结合试验中,有多种供试植物挥发物分子能使1-NPN的相对荧光强度降低到50%以下,其中包括能引起烟粉虱趋避行为的化合物,如3-蒈烯、p-伞花烃、顺-3-己烯-1-醇和α-蒎烯(KD值分别为26.47、39.43、54.01和83.46μmol·L-1),且3-蒈烯具有较强的竞争结合能力,能在200μmol·L-1时将1-NPN报告子相对荧光值竞争至约40%。【结论】Q型烟粉虱CSP1蛋白能与测试的多种寄主植物挥发物产生较为广谱的结合能力,尤其与对烟粉虱有趋避性的挥发物的结合更强,表明CSP1很有可能参与Q型烟粉虱对非寄主植物的趋避行为,这对揭示其入侵寄主选择行为生理机制具有重要意义。

关键词：烟粉虱；化学感受蛋白；原核表达；植物挥发物；结合特性

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采用熔融共混法制备了尼龙6/N-苯基马来酰亚胺-马来酸酐二元共聚物/2,2’-(1,3-亚苯基)双(2-噁唑啉)(PA6/NMA/MPBO)共混物,利用差示扫描量热法(DSC)、热重分析(TGA)、热变形温度、力学性能、熔体质量流动速率等测试研究了MPBO含量对PA6/NMA/MPBO共混物热性能及力学性能的影响。结果表明,随着MPBO含量的增加,PA6/NMA/MPBO共混物的结晶温度、熔融温度、熔融焓以及结晶度均逐渐降低,热稳定性先增加后减小;当MPBO的含量为2份时,热变形温度、拉伸强度和弯曲强度均达到最大值,分别为72.4℃、80.05MPa、106.44 MPa,较纯PA6分别提高了26.9%、15.2%和17%;当MPBO的含量为3份时,PA6/NMA/MPBO共混物熔体质量流动速率达到最低值, 仅为0.8 g/10min。

关键词：尼龙6；N-苯基马来酰亚胺-马来酸酐二元共聚物；2,2’-(1,3-亚苯基)双(2-噁唑啉)；耐热改性剂；扩链剂

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以硝酸为溶剂,采用微波消解法处理样品,建立了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定石油焦中锂、钠、镁、铝、钾、钙、钛、钒、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、镉、锑、铅等金属元素的分析方法。研究表明:实验所用超纯水和含HNO3(φ=2.5%)的空白溶液对分析结果的影响均可忽略不计;利用碰撞/反应池(CRC)系统,分别采用氦碰撞模式(氦气流速为 5.2mL/min)、氢反应模式(氢气流速为5.8mL/min)和普通模式,可有效地消除多原子离子质谱干扰;采用内标元素45Sc、72 Ge、89 Y、115In、209Bi校正了基体效应,提高了分析方法的准确性。各元素线性关系良好,线性相关系数不小于0.999 7,方法的检出限为11.2~216.7ng/L。采用实验方法对石焦油样品中18种金属元素进行测定,结果 的相对标准偏差(RSD,n=11)在1.5%~4.1%之间,加标回收率在91%~110%之间。方法应用于3批石油焦实际样品分析,结果与电感耦合等离子体原子发射光谱法一致。

关键词：电感耦合等离子体质谱法；石油焦；金属元素；碰撞/反应池

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目的：建立GC测定阿那曲唑中的11种残留溶剂，用GC-MS对样品中检出的残留溶剂进行确证。方法：采用顶空进样，色谱柱为DB-624(6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷固定液)石英毛细管柱，柱温为40℃，维持7min，以10℃·min-1速率升至180 ℃，维持4min，二甲基甲酰胺为溶剂。结果：被测物均能得到很好的分离，峰面积与浓度呈良好的线性关系，精密度和回收率良好，通过GC-MS对样品中检出的残留溶剂进行了确证。结论：该法可用于阿那曲唑原料药中残留溶剂的检测。

关键词：阿那曲唑；气相色谱法；气相色谱-质谱联用；残留溶剂；顶空进样

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目的 观察姜黄素对星形孢菌素(staurosporine,STS)介导的神经元毒性损伤细胞存活率的影响,以阐明细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)介导姜黄素抑制STS诱导神经元毒性损伤的作用。方法 运用SD大鼠乳鼠海马神经元原代培养细胞,STS诱导建立细胞毒性损伤模型。实验随机分6组:正常对照组、STS模型组、PD098059+STS模型组、姜黄素+STS预处理组、姜黄素+PD098059+STS组和姜黄素组。用MTT法测定细胞活性,以乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率分析细胞毒性,4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞凋亡效应,Western blot法检测ERK1/2在姜黄素预处理对STS介导神经元凋亡抑制中的作用。结果 姜黄素+STS预处理组的细胞活性比STS模型组明显升高(P<0.001);与PD098059+STS模型组比较,姜黄素+PD098059+STS预处理组细胞活性差异无统计学意义;与姜黄素+STS预处理组比较,姜黄素+PD098059+STS神经元存活率明显降低(P<0.001);姜黄素+STS预处理组的细胞毒性明显小于STS模型组(P<0.001)。STS模型组呈现典型的细胞凋亡特征,姜黄素可抑制STS介导的神经元凋亡;姜黄素+STS预处理组p-ERK1/2蛋白表达量明显高于STS模型组(P<0.001)。结论 姜黄素通过上调p-ERK1/2的表达抑制STS介导的神经元毒性损伤;PD098059阻断神经细胞p-ERK1/2的表达后,姜黄素抑制STS介导的神经元毒性损伤作用未能顺利实施,说明ERK1/2能够介导姜黄素抑制STS诱导神经元毒性损伤。

关键词：ERK1/2；姜黄素；星形孢菌素；海马神经元；PD098059

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基于MATLAB/Simulink仿真平台，采用平均值法建立柴油机仿真模型，进行柴油机工作过程的仿真。以4190 ZLC-2型船用增压四冲程柴油机为例进行试验，并将试验数据与原机试验数据进行对比，证明模型具有较高的仿真精度。在此基础上，利用该仿真模型研究压缩比对4190ZLC-2型柴油机性能的影响，为柴油机的性能开发和优化设计提供依据。

关键词：船舶工程；4190 ZLC-2型船用柴油机；MATLAB/Simulink；压缩比；系统仿真；性能分析

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氯氮平(clozapine)是一种非典型抗精神病药物,临床用于治疗精神分裂症,不仅对精神分裂症阳性症状有效,而且对情感症状、敌对行为、阴性症状以及认知损害具有改善作用[1,2],可预防精神分裂症的自杀风险[3]。其疗效较好,对第一代抗精神病药物无效的精神分裂症患者应用氯氮平治疗有效率可达30%~60%[4],对滥用药物具有抗渴求效果[5],并对难治性情感性精神障碍具有显著

关键词：氯氮平；呃逆；药物不良反应

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利用甘油和苯甲醛为原料,通过缩合、氧化、水解三步法合成了1,3-二羟基丙酮(1,3-Dihydroxyacetone,简写为DHA)。对合成工艺进行了优化改进,用对甲苯磺酸铜取代腐蚀性强、副反应多的质子酸作催化剂,用甲苯替换高毒性的苯作结晶溶剂,考察了不同阶段的影响因素。优化后单步反应累计收率从18.7%提高到34.6%,并且对环境的污染减少,工艺简单安全。用GS-MS、NMR、IR对中间体和目标产物进行了定量和定性分析。

关键词：甘油；苯甲醛；1,3-二羟基丙酮；DHA

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采用单辊法制备宽为20 mm、厚为25μm的Fe78Si9B13合金带材,用XRD和DSC分析其非晶形成能力、晶化行为和热稳定性,并研究退火温度对其软磁性能的影响。结果表明:淬火态Fe78Si9B13合金带材为非晶态,一级起始晶化温度Tx1为517℃;二级起始晶化温度Tx2为530℃;当退火温度升高到450℃,开始部分晶化,微量析出bcc结构的α-Fe(Si)晶化相,磁化曲线呈一定的线性关系,即合金呈恒导磁特性。随着退火温度的升高,Fe78Si9B13合金带材的初始磁导率μi、饱和磁感应强度Bs和矫顽力Hc,呈先增大后减小的趋势。测试频率为50 Hz,随着退火温度的升高,磁导率μa呈先增大后减...

关键词：Fe78Si9B13合金；非晶形成能力；退火；软磁性能

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目的探讨Beclin-1蛋白和PTEN蛋白在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测65例甲状腺癌及25例正常甲状腺组织中Beclin-1蛋白和PTEN蛋白的表达,并对其与性别、年龄、病理学分型、TNM分期及淋巴结转移的关系进行分析。结果 65例甲状腺癌中Beclin-1蛋白和PTEN蛋白的阳性表达率均低于二者在正常甲状腺组织中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。在甲状腺癌中Beclin-1蛋白在伴淋巴结转移组阳性率20.5%低于不伴淋巴结转移组50.0%;PTEN蛋白在伴淋巴结转移组阳性率20.5%低于不伴淋巴结转移组46.2%;在TNM为Ⅲ、Ⅳ期组阳性率14.3...

关键词：甲状腺癌；Beclin-1蛋白；PTEN蛋白；免疫组织化学

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