关键词：茶树；MYB转录因子；基因克隆；表达分析
摘 要：MYB类转录因子是一类包含一段保守的DNA结合结构域的基因家族,广泛地参与植物发育和植物次生代谢的调节.根据前期芯片杂交和文库筛选得到的2个MYB转录因子的部分序列,采用RT-PCR和RACE技术分离得到它们的全长基因:C3MYBI和C3MYB2,在GenBank的登录号分别为HQ660373和HQ660374.序列分析表明:CsMYBI基因全长1132bp,开放阅读框长879bp,编码292个氨基酸,推测的蛋白分子量约为32.9ku,理论等电点为8.13:CsMYB2基因全长1020bp,其中开放阅读框长675bp,编码224个氨基酸,推测的蛋白分子量约为25.4ku,理论等电点为9.05.2个基因编码的蛋白均具有明显的R2R3M YB结构域,且在R3结构域的下游都含有1个相对保守的C1(LIXXGIDPXTHR)基序.同源性分析表明:茶树CsM YBI和CsMYB2编码的氨基酸序列与其他植物的MYB类转录因子具有较高的相似性,其中CsMYBI编码的氨基酸序列与陆地棉MYBI的相似性为57％,CsMYB2编码的氨基酸序列与葡萄MYBC2的相似性为75％.利用荧光定量PCR技术检测2个转录因子基因在遮荫处理条件下的表达规律,及其在茶树不同组织中的表达特性,结果表明:CsMYBI和CsM YB2在不同组织中均有表达,但表达量具有明显区别,其中CsM YB2在叶片中的相对表达量是根中的100多倍；而遮荫处理能明显降低叶片中的花青素含量,并提高CsMYBI的表达,但对转录因子CsMYB2的影响不大.