关键词：适配体;微磁珠分离;实时定量聚合酶链式反应;凝血酶;ATP
摘 要：利用适配体的识别能力和可扩增性,构建了基于微磁珠分离技术的适配体实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测方法.通过微磁珠偶联的互补链与适配体序列之间的碱基配对结合,有效除去溶液中未与靶分子结合的适配体序列,采用实时定量PCR技术测定上清液中结合态的适配体序列浓度,从而间接实现对靶分子的定量检测.分别选取代表生物大分子和有机小分子的凝血酶和ATP作为检测对象,验证了该方法的普适性.研究结果表明,在获取特异性适配体序列后,仅需简单优化其互补链序列,即可对超低含量的凝血酶和ATP进行准确定量,检出限分别为50 pmol/L和5μmol/L.该方法具有同时适用于高特异性和高灵敏度地检测生物大分子和有机小分子的优势.