关键词：原子力显微镜;;肌动蛋白;;多肽;;自组装;;机械力诱导;;支撑磷脂双层膜;;荧光光谱
摘 要：肌动蛋白是细胞中三种主要细胞骨架蛋白之一。它在体内保持一种聚合和解聚的动态平衡,在体外能对抗解聚,这对于使用肌动蛋白形成纤维状结构域或纳米线是非常重要的。肌动蛋白纳米器件的构建研究多为一维纳米线,二维结构的构建研究较为缺乏。本文研究了纳米机械力诱导和表面促进自组装的机制,利用原子力显微镜(AFM)针尖诱导肽(Pepll)和蛋白(Actin)在特定的表面上组装成纳米模板,探讨了在液体/膜界面上机械力如何影响液体/膜界面的肌动蛋白聚合行为。采用构建肌动蛋白-磷脂膜作用模型的方式,在不借助肌动蛋白相关蛋白和聚合溶液的情况下,肌动蛋白单体在阳离子磷脂膜的表面诱导和外部纳米机械力的共同作用下聚合成双螺旋纤维状肌动蛋白。结合荧光光谱法分析了磷脂脂质体在溶液条件下与肌动蛋白的相互作用,发现无论是在界面上还是在液体中,正电磷脂都能诱导肌动蛋白单体组装形成纤维。本论文主要提供了一种操控多肽组装和蛋白质聚合成二维纳米图案的方法。使用原子力显微镜的探针对样品进行操纵,在云母和磷脂膜表面上形成纳米图案。原子力显微镜的纳米机械力和不同脂质成分组成的阳离子带电磷脂双层膜,加快了多肽和蛋白质自组装速率,使其在基底特定区域形成长时间稳定的纳米纤维结构。此方法简单易行,可在特定衬底上制备和构建蛋白相关的纳米级图案和模板。
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