关键词：金黄色葡萄球菌;核酸适体;荧光探针;食品安全
摘 要：以金黄色葡萄球菌（S.aureus）为研究目标菌，开发了一种无标记核酸适体（aptamer）荧光探针，用于复杂食品基质中致病菌的快速检测。针对目标菌的aptamer，设计了全链的嵌段式互补序列，结合可特异性插入DNA双链结构并显著增强荧光发射的SYBR Green I（SG-I）染料，实现了探针的特异性识别和起始信号的双重放大。当目标菌存在时，由于探针中的互补序列为嵌段式，杂交作用力弱于S.aureus和aptamer的特异性结合。因此，目标菌能够与互补序列竞争aptamer，破坏DNA双链结构而释放SG-I，使得探针荧光显著降低。结果表明，在最佳实验条件下，荧光信号变化值（ΔF）与S.aureus浓度（c）的对数在1.00×10～2～1.00×10～9 CFU/m L范围内呈良好的线性关系，回归方程为ΔF=221.0logc+687.1，线性相关系数R²=0.9918，检出限可低至13 CFU/m L。该方法用于鸡肉、牛奶和鸡蛋样品测定，加标回收率在95.2%～104.7%之间，相对标准偏差在3.9%～7.6%。
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