关键词：茶树；内生真菌；多酚氧化酶；菌株筛选；培养基优化
摘 要：以愈创木酚、α-萘酚、没食子酸、L-酪氨酸和单宁酸等5 种酚类物质为底物，采用鉴别培养基筛选法从14 株茶树内生真菌中初筛获得4 株产多酚氧化酶的真菌。根据变色圈的大小、颜色深浅和摇瓶发酵的结果复筛获得产多酚氧化酶能力较强的菌株CSN-13。对菌株CSN-13 产酶营养条件进行初步分析，结果表明，在供试的6 种碳源物质中，以麸皮对菌株CSN-13 产多酚氧化酶的促进作用最为明显；供试的5 种氮源物质中，以硝酸铵的促进作用最为明显； 在发酵培养基中添加茶水， 对产酶有明显的促进作用。采用正交设计对CSN-13 产酶发酵培养基进行初步优化，优化后的培养基配方为：麸皮（40 g·L-1）、硝酸铵（15 g·L-1）、茶水（4 g·L-1）、KH2PO4（2 g·L-1）、MgSO4·7H2O（0.5 g·L-1）、无水CaCl2（0.075 g·L-1）、CuSO4·5H2O（0.01 g·L-1）。采用优化后的培养基，菌株CSN-13 在28℃下培养5 d，酶活力达到241 U·mL-1·min-1，比优化前提高8.5 倍。茶树内生真菌菌株CSN-13 及其发酵产酶培养基的研究为多酚氧化酶的进一步开发打下了基础。