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芫荽酸性磷酸酶的提取、纯化及酶学性质
作者:王丹;万骥;傅婷;唐云明 作者单位:西南大学生命科学学院;淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室;三峡库区生态环境教育部重点实验室 加工时间:2015-05-03 信息来源:食品科学 索取原文[9 页]
关键词:芫荽;酸性磷酸酶;分离纯化;酶学性质
摘 要:采用硫酸铵分级沉淀,CM-sepharose 离子交换层析,Superdex-200 凝胶过滤层析方法,从芫荽中分离纯化出电泳纯的酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)。该酶的回收率为14.2%,纯化倍数为238.6 倍,比活力为295.87U/mg,亚基分子质量约为53.8kD;ACP 酶学性质研究表明:最适反应温度为55℃,在温度为40℃以下时较稳定,因此该酶对温度较敏感;最适反应pH 为5.8,在pH4-7 之间较稳定,表明该酶耐受于酸性环境;ACP 对对硝基苯酚的Km 值为0.63mmol/L,表明该酶与底物对硝基苯酚具有较高的亲和力;甲醇、乙醇、异丙醇、抗坏血酸、草酸、Cu2+、Pb2+、Ag+对该酶具有强烈的抑制作用;Mg2+、Mn2+、Ba2+、K+对该酶具有一定的激活作用。
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