固相萃取-HPLC柱后氧化衍生荧光法测定运动营养食品中叶酸的含量
关键词:叶酸;高效液相色谱-荧光检测法;固相萃取;柱后氧化衍生;运动营养食品
摘 要:本文开发了固相萃取-HPLC柱后氧化衍生荧光法测定运动营养食品中叶酸含量的方法。分别考察了沉淀蛋白法、酶解蛋白法及固相萃取法的样品前处理方式及流动相的优化条件,最终选择反相弱阴离子交换Strata-X-AW固相萃取小柱纯化,Venusil MP C_(18)色谱柱分离,柱后衍生仪氧化衍生(5%过二硫酸钾溶液),以50 mmol磷酸二氢钾(pH3.5)∶乙腈=90∶10 (V/V)为流动相,再经荧光检测器进行检测。结果表明,在0.232~2.318μg/mL范围内方法线性良好,R~2=0.9971,进样量为10μL,方法的仪器定量限为0.0774μg/mL,灵敏度足以满足运动营养食品中叶酸的检测需要,方法回收率在96.98%~100.50%之间,标准品、样品溶液在8 h内稳定。本方法很好地解决复杂基质运动营养食品中叶酸的提取、净化除杂等问题。操作方便快捷,结果准确,线性范围广,灵敏度高,重现性、专属性、回收率及稳定性较为满意,能够满足日常运动营养食品中叶酸含量检测的需求。
内 容:原文可通过湖北省科技信息共享服务平台(http://www.hbstl.org.cn)获取