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逆境胁迫下柽柳脂质转运蛋白基因(ThLTP)的克隆与功能初步分析
作者:林琳;李健;李慧玉;穆怀志;姜静 作者单位:东北林业大学,林木遗传育种国家重点实验室,黑龙江 哈尔滨 150040 加工时间:2014-03-15 信息来源:《林业科学研究》
关键词:刚毛柽柳;脂质转移蛋白;抗旱耐盐性;表达分析
摘 要:从以刚毛柽柳为材料构建的NaCl胁迫的根cDNA文库中测序得到1条LTP基因序列,其全长为635 bp、编码116个氨基酸,命名为ThLTP基因.采用实时荧光定量RT-PCR的方法,分别对0.2 mol·L-1 NaC1、150 μmol·L-1CdCl2 、20%(W/V)PEG6000、100 μmol·L-1 ABA及4℃下ThLTP基因在柽柳中的表达模式进行了分析,结果表明:ThLTP基因除了在4℃条件下根组织中为下调表达外,在其它处理中均表现为上调表达.将ThLTP基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli的原核表达载体pET32a中,对重组菌Escherichia coli BL21(pET32a-LTP)的抗旱耐盐性进行分析.结果表明:在0.8%(W/V)NaC1和20%(W/V)PEG6000条件下,对照菌E.coli BI21(pET32a)无对数生长期,而重组菌E.colii BL21(pET32a-LTP)经过3h的延迟生长后,进入到对数增长期,表明ThLTP可受盐、碱、低温诱导并能提高重组菌的抗旱耐盐能力.
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