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基于MALDI-TOF质谱技术分析人宫颈癌HeLa细胞N-糖链结构轮廓
作者:王培培;于广利;焦广玲;赵峡;李静;柴文刚 作者单位:中国海洋大学医药学院,海洋药物教育部重点实验室,山东省糖科学与糖工程重点实验室,青岛266003 加工时间:2014-04-15 信息来源:《高等学校化学学报》
关键词:肿瘤;HeLa细胞;N-糖链;基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱
摘 要:以微量HeLa细胞(107个)为对象,经细胞裂解、还原羧甲基化、胰酶降解和Oasis-HLB柱提取分离得到总糖肽后,用PNGase F酶解释放N-糖链,对所得N-糖链用Sep-Pak C18柱纯化后进行完全甲基化衍生,再采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱( MALDI-TOF MS)分析HeLa细胞表面N-糖链的结构轮廓.结果表明,在获得的34种N-糖链中,除高甘露糖型、二天线、三天线、四天线和五天线等N-糖链外,还出现了在某种程度上与肿瘤发生转移相关的特殊平分型和Lewis结构.利用MALDI-TOF MS技术可快速分析微量癌细胞表面N-糖链的结构轮廓,为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持.
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