关键词：合成生物学；青蒿二烯；酿酒酵母；基因工程；发酵
摘 要：为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯,以酿酒酵母作为底盘细胞,利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数,并增加重组菌株基因型的稳定性,选择酵母基因组中多拷贝位点Delta为整合点,实现酿酒酵母内源基因t HMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达t HMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量;而导入外源基因ADS,实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验,人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L-1;为了进一步提高青蒿二烯产量,经过发酵过程优化和补料策略,人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.0...
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