关键词：快速定点突变；谷胱甘肽过氧化物酶；人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶
摘 要：先将人Zeta型谷胱甘肽硫转移酶1c-1c(hGSTZ1c-1c)中非催化中心的Cys-137，Cys-154，Cys-165和Cys-205突变为Ser，然后将催化中心14，15和17位的3个氨基酸残基突变为Cys，再利用半胱氨酸缺陷型大肠杆菌表达系统将其特定地转化为Sec，即把GPx的催化基团引入到hGSTZ1c-1c中，高效地获得了具有谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活力的模拟酶。其中制备的3个含硒突变体15C，14C/15C和17C均显示出明显的GPx活力。对非含硒突变体性质研究发现，Ser-14或Ser-15任何一个残基发生突变都会导致hGSTZ1c-1c的GST活力几乎丧失，表明Ser-14和Ser-15在催化反应中发挥着重要作用，但前者主要参与底物结合，后者更侧重于催化。