关键词：茶尺蠖；类免疫球蛋白；基因克隆；表达分析
摘 要：类免疫球蛋白（Hemolin）是一种鳞翅目昆虫特有的免疫相关蛋白，也是唯一的无脊椎动物免疫球蛋白家族成员。本实验应用RACE 技术获得了茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）类免疫球蛋白基因的全长cDNA 序列，命名为EoHML（GenBank 登录号：KM885983），并分析了相关生物信息学特性，检测了病毒感染后基因的表达水平。结果表明，EoHML 基因序列全长1 772 bp，包含1 239 bp 的开放阅读框，编码412 个氨基酸，预测蛋白分子量大小为45.8 kD，等电点（pI）为8.297，属于典型的分泌型蛋白，且具有昆虫Hemolin 基因保守的4 个Ig 功能区和2 个N-glycosylation 位点。系统进化分析表明，该蛋白与目前已知的类免疫球蛋白氨基酸序列的亲缘关系都较远，与烟草天蛾（Manduca sexta）类免疫球蛋白氨基酸序列相似度最高，为53%。荧光定量检测结果表明，茶尺蠖核型多角体病毒EoNPV）感染茶尺蠖幼虫后该基因表达量显著升高，最高表达量是正常对照的36.5 倍，表明茶尺蠖EoHML 基因可能参与了茶尺蠖对EoNPV 的免疫代谢反应。