关键词：人参；人参皂苷Rb1；成骨细胞；增殖；分化
摘 要：目的观察人参皂苷Rb1对成骨细胞增殖、分化的影响。方法选取出生24 h之内的SD乳鼠10只,提取分离成骨细胞,并经细胞形态观察、碱性磷酸酶活性化学染色法以及Giemsa染色法鉴定。根据加入不同浓度的人参皂苷Rb1将成骨细胞分为0、10-8、10-7、10-6、10-5mol/L 5组;采用CCK-8法检测加药24、48、72 h后对成骨细胞增殖的影响;采用PNPP法检测成骨细胞中ALP活性,分析不同浓度的人参皂苷Rb1对成骨细胞分化的影响;Real-Time PCR法检测增殖标记基因PCNA、Ki67和分化标记基因COL1、BGP的表达水平。结果成功分离获得成骨细胞,经细胞形态学鉴定和染色结果显示细胞满足后续实验要求。CCK-8法检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1不同浓度组对成骨细胞均有不同程度的促进增殖作用(P<0.05,P<0.001);碱性磷酸酶(ALP)比活性检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1 10-7、10-6、10-5mol/L浓度组分别培养3、5、7 d后,及10-8mol/L培养7 d后,成骨细胞活性均有显著升高(P<0.05,P<0.001),最佳效果浓度组为10-6mol/L;Real-Time PCR法检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1 10-7、10-6、10-5mol/L各浓度组均能显著提高成骨细胞PCNA、Ki67、BGP、COL1 mRNA表达水平,10-8mol/L可显著提高COL1mRNA表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.001),其中以10-6mol/L浓度组效果最佳。结论不同浓度(10-8、10-7、10-6、10-5mol/L)人参皂苷Rb1对成骨细胞增殖、分化具有明显促进作用。