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原子转移自由基聚合(ATRP)阳离子化菊粉作为非病毒基因载体的研究
作者:王静云;付雪;包永明 作者单位:大连理工大学生命科学与技术学院 加工时间:2014-11-16 信息来源:高等学校化学学报 索取原文[7 页]
关键词:菊粉多糖;原子转移自由基聚合(ATRP);绿色荧光蛋白表达质粒(pGFP);β半乳糖苷酶表达质粒(pβgal);非病毒基因载体
摘 要:利用原子转移自由基聚合(ATRP)将聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯[P(DMAEMA)]偶联到菊粉多糖(Inulin)上,合成了新型基因载体PDIN.利用核磁共振仪、动态光散射分析仪、透射电子显微镜和凝胶电泳对PDIN及其与质粒pDNA的复合物进行了表征。凝胶阻滞实验结果表明,PDIN可以通过静电相互作用稳定结合pDNA。噻唑蓝(MTT)细胞毒性测试、溶血实验、绿色荧光蛋白表达质粒(pGFP)及β半乳糖苷酶表达质粒(pβgal)转染实验结果表明,PDIN对MCF-7,Hela,COS7和HepG2细胞的毒性较小;其溶血率低,具有良好的血液相容性;载体PDIN能有效将pGFP和pβgal带入COS7细胞并表达,在N/P为1时转染效率最高,其β半乳糖苷酶的酶活为(3.36±0.74)U/mg蛋白,比Lipo2000转染效率[(4.33±0.77)U/mg蛋白]略低。因此,所合成的载体PDIN是一种有潜在应用价值的非病毒基因载体。
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