基于固定化酶的乙酰胆碱酯酶抑制剂体外筛选模型的建立
作者单位：陈晨,CHEN Chen(国家海洋局第一海洋研究所现代分析技术及中药标准化重点实验室,青岛266061;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306)史倩,陈军辉,张茹潭,李鑫,郑立,SHI Qian,CHEN Jun-Hui,ZHANG Ru-Tan,LI Xin,ZHENG Li(国家海洋局第一海洋研究所现代分析技术及中药标准化重点实验室,青岛,266061)王小如,WANG Xiao-Ru(国家海洋局第一海洋研究所现代分析技术及中药标准化重点实验室,青岛266061;厦门大学化学化工学院,厦门361005)
加工时间：2014-05-15
信息来源：高等学校化学学报
关键词：固定化酶;乙酰胆碱酯酶抑制剂;靶酶抑制剂筛选
摘 要：以可重复使用的固定化酶代替游离态酶,建立一种基于比色分析的乙酰胆碱酯酶(ACHE)抑制剂体外筛选新模型.采用以氨基化硅胶为载体固定的AChE优化了实验条件,用AChE抑制剂阳性对照物他克林和毒扁豆碱对该模型进行验证,还对模型技术参数进行评价,并将新模型用于单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制活性评价.结果表明,最佳实验条件为:固定化酶用量55 μL,底物浓度5 mmol/L,甲醇、乙醇及体积分数不高于6％的二甲基亚砜水溶液均可作为样品溶剂；模型验证及模型技术参数评价结果良好,该模型对AChE抑制剂筛选有较好的特异性和灵敏度,可用于筛选AChE抑制剂.该模型具有适用性强、固定化酶可重复使用及结果可靠等优点,是单体化合物及天然产物粗提物AChE抑制剂活性评价的有效方法.
027-87841330