关键词：骨关节炎;软骨细胞;应力,物理;铁死亡;Piezo1
摘 要：目的 探讨过度机械应力调控Piezo1通道诱发小鼠成软骨细胞铁死亡的作用机制。方法 选取小鼠ATDC5成软骨细胞系进行实验，使用siRNA-Piezo1干扰质粒和Piezo1过表达质粒转染细胞，给予机械应力刺激（MS），构建对照组（Control组）、MS组、MS+siRNA-Piezo1组（MS+sh组）和MS+Piezo1过表达组（MS+OV组）。用细胞增殖和毒性检测法（CCK-8）检测各组细胞增殖活力，透射电镜观察线粒体的形态和结构，生化检测氧化应激和亚铁离子(Fe²⁺)水平，流式细胞术检测脂质活性氧（ROS）水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、Ⅱ型胶原蛋白（CollagenⅡ）、基质金属蛋白酶（MMP）-13、蛋白聚糖（Aggrecan）及p53蛋白的表达水平。结果 与Control组比较，MS组细胞活力下降，Fe²⁺、ROS、丙二醛（MDA）水平升高，还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）水平降低（均P<0.05），电镜示线粒体嵴减少，SLC7A11、GPX4、CollagenⅡ、Aggrecan蛋白水平下降，p53和MMP-13蛋白水平则升高（均P<0.05）。与MS组比较，MS+sh组的Fe²⁺、ROS、MDA水平下降，GSH、SOD水平升高（均P<0.05）,SLC7A11、GPX4、CollagenⅡ、Aggrecan蛋白水平升高，MMP-13和p53蛋白水平下降（均P<0.05）。与MS组比较，MS+OV组的细胞活力下降，Fe²⁺、ROS、MDA水平升高，GSH、SOD水平降低，SLC7A11、GPX4、CollagenⅡ、Aggrecan蛋白水平下降，MMP-13和p53蛋白水平上升（均P<0.05）。结论 过度机械应力能够通过Piezo1通道蛋白介导成软骨细胞铁死亡，促进细胞外基质降解。
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