关键词：跨越式滚环等温扩增;双染料;比色检测;沙门氏菌
摘 要：沙门氏菌是导致腹泻病的四大原因之一，对人类健康危害极大。本研究基于甲酚红（CR）和羟基萘酚蓝（HNB）的不同作用模式和显色原理，建立一种跨越式滚环等温扩增（SRCA）双染料比色法，用于沙门氏菌的可视化检测。首先针对沙门氏菌设计SRCA引物组，然后优化双染料添加量，建立SRCA双染料比色检测方法。通过特异性、灵敏度和检出限试验，对该方法进行评估。通过检测60份实际样品，评价该方法的实际应用性能。结果表明：HNB/CR最佳浓度比为0.6，即HNB浓度为75 μmol/L，CR浓度为125 μmol/L。用该方法检出8株沙门氏菌为阳性，其余15株非沙门氏菌菌株均为阴性。该方法灵敏度为6.8 CFU/mL，是PCR方法(6.8×10² CFU/mL)的100倍。检出限为9.5 CFU/mL，比PCR方法(9.5×10² CFU/mL)低100倍。检测实际样品，计算其敏感性、特异性和符合率分别为100%，98.2%，98.3%。本研究建立的SRCA双染料比色方法能够特异、准确、灵敏地检测沙门氏菌。与使用单一染料相比，双染料混合使用使阴性（紫色）与阳性（绿色）样品间具有更高的色相对比度和更广的颜色变化范围。此外，比色染料可预先加入反应体系之中，能有效避免二次污染。
内 容：原文可通过湖北省科技资源共享服务平台(https://www.hbsts.org.cn/)获取