关键词：快速检测;多重实时聚合酶链反应技术;产志贺毒素大肠埃希氏菌;冻干
摘 要：目的 建立多重实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法快速检测食品中的产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)的方法。方法 以产志贺毒素大肠埃希氏菌携带的毒力基因stx1、stx2和黏附基因eae靶基因引物探针建立多重实时PCR体系,并采用原位冻干技术将PCR反应体系和阳性质控品进行了预先分装冻干,制成稳定、便捷的即用型反应体系,随后对方法的灵敏性、特异性和稳定性进行评价。结果 所建立的多重实时PCR法检测eae、stx1、stx2基因的灵敏性为10～2 CFU/mL。与32种非STEC菌均无交叉反应。整体检测时长可控制在1 h以内,冻干体系可在常温条件下保存1年以上。结论 本方法快速、简便,适用于测定食品中的STEC。
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