可视化跨越式滚环扩增技术检测食品中单增李斯特氏菌
关键词:跨越式滚环等温扩增技术(SRCA);单增李斯特氏菌;hlyA基因;检测;可视化
摘 要:本研究建立了一种新型的单增李斯特氏菌检测方法——即通过可视化跨越式滚环等温扩增(Saltatory rolling circle amplification,SRCA)技术检测单增李斯特氏菌。根据单增李斯特氏菌hlyA基因序列设计引物,进行特异性验证,对灵敏度和人工污染样品的检出限进行测定。另外,通过检测70种实际食品样品对SRCA方法的敏感性、特异性和符合率进行评价。结果表明:所有单增李斯特氏菌呈阳性结果,非单增李斯特氏菌呈阴性结果,说明该方法特异性良好。SRCA方法的灵敏度为8.9 × 10~(0) fg/μL,检出限为2.8 × 10~(0) CFU/g,均为PCR方法的1000倍。在实际样品的检测中,SRCA方法与GB 4789.30-2016方法进行比较,其敏感性、特异性和符合率分别为100%、97.01%和97.14%。结论:可视化跨越式滚环等温扩增技术具有操作简便,设备简单,特异性强,灵敏度高,检出限低,检测成本低等优点,适用在基层单位和中小型食品企业中推广应用。
内 容:原文可通过湖北省科技信息共享服务平台(http://www.hbstl.org.cn)获取