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鸦葱总黄酮保肝作用的体内外研究
目的探索鸦葱总黄酮在体内、体外的保肝作用。方法体内实验:ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、鸦葱总黄酮低、中、高剂量组,采用四氯化碳(CCl4)诱导急性化学性肝损伤模型和卡介苗+脂多糖诱导急性免疫性肝损伤模型,检测各组血清中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,光镜下观察肝脏结构变化。体外实验:原位胶原酶消化法提取分离Wistar大鼠肝细胞,采用四氯化碳诱导肝脏细胞损伤,鸦葱黄酮溶液干预培养细胞4 h后检测上清培养液中AST、ALT、LDH、一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和肝细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果在四氯化碳诱导急性化学性肝损伤和卡介苗+脂多糖诱导急性免疫性肝损伤2组模型中,HE肝脏病理切片显示鸦葱总黄酮组的肝损伤明显轻于模型组,模型组AST、ALT、LDH活性均显著高于空白组(P<0.01);阳性药组上述指标活性均显著低于模型组(P<0.01,P<0.05);鸦葱总黄酮低、中、高剂量组上述指标活性均显著低于模型组(P<0.01,P<0.05)。在四氯化碳诱导大鼠肝细胞损伤体外实验中,模型组AST、ALT、LDH、MDA、NO活性均显著高于空白组(P<0.01),SOD活性显著低于空白组(P<0.01);阳性药组AST、ALT、LDH、MDA、NO活性均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),SOD活性均显著高于模型组(P<0.01);鸦葱总黄酮低、中、高剂量组AST、ALT、LDH、MDA、NO活性均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01),SOD活性均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论鸦葱总黄酮对四氯化碳诱导的小鼠化学性肝损伤、卡介苗+脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤和大鼠肝细胞损伤有显著的保护作用,为开发和利用鸦葱资源、研制保肝新药提供了实验依据。
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米索前列醇的序贯疗法对药流患者血清凋亡因子及远期疗效的影响研究
目的探讨米索前列醇的序贯使用对早孕患者血清凋亡因子及远期疗效的影响研究。方法选取辽宁中医药大学附属第四医院计划生育门诊就诊要求终止妊娠的早孕妇女80例,随机数字表达法分为2组,对照组40例,口服米非司酮25 mg后,予以常规米索前列醇600μg,1天4次口服;实验组40例,米索前列醇行序贯给药方式。观察用药7 d后药流效果,检测患者药流前后血清中survivin、caspase-3及性激素水平变化。随访2年,统计用药后妇科炎症、痛经、不孕等副反应的发生率。结果与对照组比较,实验组完全流产率较高(P<0.05);经2年随访,实验组患者药流后药物副反应发生率低于对照组(P<0.05);服药7 d后,与对照组比较,实验组人绒毛膜促性腺激素、孕酮及雌三醇的含量较低(P<0.05);服药7 d后,血清survivin水平降低,caspase-3水平升高,与对照组相比,实验组患者血清中survivin水平较低,caspase-3水平较高(P<0.05)。结论米索前列醇的序贯使用能够提高药流人流的成功率,降低人流术的并发症,可能其与抑制survivin表达,上调caspase-3水平有关。
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不同生长发育期味连次生代谢产物积累变化研究
目的:研究重庆石柱道地中药材味连在不同生长发育期的次生代谢产物积累动态变化规律,为确定最佳采收期,实现该地区味连的GAP种植和质量控制提供理论依据。方法:采集不同生长发育期的4年生味连样品,采用HPLC测定表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。结果:表小檗碱含量在抽葶开花期的最高(1.82%),冬季休眠期最低(1.33%);黄连碱含量在新叶盛发期最高(3.86%),冬季休眠期最低(2.79%);巴马汀含量在新叶盛发期最高(2.32%),冬季休眠期最低(1.69%);小檗碱含量在新叶缓发期最高(10.89%),冬季休眠期最低(8.28%)。结论:味连次生代谢产物的含量随植株的生长发育而波动,其中新叶盛发期、新叶缓发期和抽葶开花期的生物碱含量高于根茎充实期和冬季休眠期。最佳采收期应结合产量和次生代谢产物含量综合判断。
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多聚赖氨酸在大鼠海马神经元原代培养中工作浓度的研究
目的优选多聚赖氨酸(poly-D-lysine,PDL)在大鼠海马神经元原代培养中的最佳工作浓度。方法颈椎脱臼处死孕18 d的Wistar大鼠3只,取出胚胎并分离脑组织。迅速分离海马组织,胰酶消化,吹打并以合适浓度(30万/3.5 cm皿)接种于0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1、2 mg/m L的PDL工作浓度包被的培养皿中,采用相差显微镜观察神经元形态,同时采用CCK-8试剂盒进行神经元活性检测。结果神经元接种4 h后贴壁,1 d后突起发生,4 d后与周围神经元形成联系,7 d后成熟并形成网状联系。PDL最佳工作浓度范围位于0.25~0.75 mg/m L,神经元在此浓度范围内生长状态及活性最佳。结论通过实验确定了PDL最佳工作浓度,对于神经元培养有重要意义。